CELL-C0161 MRC-5人胚肺成纤维细胞-道赛尔生物

物种：人

性别/年龄:男；14周龄

组织来源：肺

生物安全等级：BSL-1

生长状态：贴壁生长

细胞形态：成纤维细胞样

培养条件：

培养基类型：MEM（Daucell，货号DCM0001）培养基

FBS（Daucell，货号DCF8001）: 10%

培养条件：37℃，CO2: 5%

传代方法：

Ø 收到细胞后，在倒置显微镜下观察细胞生长状态：

1) 如果没长满，将培养瓶用75%酒精消毒后放在培养箱静置数小时（4h左右），稳定细胞状态，静置后镜检，拍照，记录细胞状态。建议传代后也拍照记录细胞生长情况。

2) 如果细胞已经长满（约80%-90%）则传代后继续培养。

Ø 贴壁细胞传代方法：

1) 弃去培养基，用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次；

2) 加1ml 0.25%的胰酶，让胰酶与大部分细胞接触，随时观察细胞状态变化，待细胞大部分变圆后加完全培养基终止消化。

Ø 悬浮细胞传代方法：可以直接传代也可以离心法传代。

1) 直接传代是让悬浮细胞慢慢沉淀在瓶底后，将上清吸掉1/2-2/3，吹打细胞形成细胞悬液后，分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续培养；

2) 离心法传代是将细胞连同培养液一并转移到离心管内， 1000rpm，5分钟，去除上清，加新的培养液到离心管内，吹打细胞形成细胞悬液后，分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续培养。

冻存方法：

Ø90%FBS，10%DMSO，现用现配。

Ø储存：液氮中长期保存。

MRC-5细胞系来自14周龄男性胎儿的正常肺组织，该细胞老化前能传代42到46次群体倍增。它是正常二倍体细胞系，46，XY核型。模式染色体数为46，概率为70%。

Ø 订购须知：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时拨打电话或邮箱联系；

注：观察细胞最好在低倍镜下观察，便于整体估计细胞密度；

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等；

3. 本库细胞在培养过程不加抗生素，请客户收到细胞后根据需要自行添加双抗（青霉素和链霉素）；

4. 请用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件；

5. 本实验室默认T25瓶复苏的存活细胞常温发货，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落，可离心吹打后重新种入瓶中培养；

6. 建议客户收到细胞后，留存一张培养瓶外观照片以及收到的细胞前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通交流；

7. 细胞培养过程外因太多，我们的售后保障期为一周，具体处理原则参见售后流程图（ www.daucell.cn）或咨询当地销售人员和经销商，但不提供免费更换服务。

Ø 注意事项：

1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2. 产品使用：本产品仅能用于科研。本产品未通过直接用于活体动物和人的审核。本产品未通过用于活体诊断的审核。