CELL-C0109 HK-2人肾近曲小管细胞
- 货号： CELL-C0109
- 规格： 1×10⁶cells/T25培养瓶
- 价格： 1200元
组织来源：肾，皮质/近曲小管
生长状态：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞
培养条件：
培养基类型：
K-SFM培养基(Gibco，货号10785-012)，100%
培养条件：37℃，CO2: 5%
传代方法：
Ø 收到细胞后，在倒置显微镜下观察细胞生长状态：
1) 如果没长满，将培养瓶用75%酒精消毒后放在培养箱静置数小时（4h左右），稳定细胞状态，静置后镜检，拍照，记录细胞状态。建议传代后也拍照记录细胞生长情况。
2) 如果细胞已经长满（约80%-90%）则传代后继续培养。
Ø 贴壁细胞传代方法：
1) 弃去培养基，用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次；
2) 加1ml 0.25%的胰酶，让胰酶与大部分细胞接触，随时观察细胞状态变化，待细胞大部分变圆后加完全培养基终止消化。
Ø 悬浮细胞传代方法：可以直接传代也可以离心法传代。
1) 直接传代是让悬浮细胞慢慢沉淀在瓶底后，将上清吸掉1/2-2/3，吹打细胞形成细胞悬液后，分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续培养；
2) 离心法传代是将细胞连同培养液一并转移到离心管内， 1000rpm，5分钟，去除上清，加新的培养液到离心管内，吹打细胞形成细胞悬液后，分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续培养。
冻存方法：
Ø90%FBS，10%DMSO，现用现配。
Ø储存：液氮中长期保存。
据报道，人肾近曲小管细胞HK-2含有HPV-16 E6/E7基因的重组逆转录病毒载体pLXSN 16 E6/E7。尽管pLXSN 16 E6/E7对新霉素有抗性，但不能用G418分离转导的克隆。该细胞系基于Southern和FISH分析可分离成单个细胞。通过PCR测定，E6/E7基因存在于HK-2基因组中。细胞保留分化良好的PTCs表型。碱性磷酸酶、γ谷氨酰转肽酶、亮氨酸氨肽酶、酸性磷酸酶、细胞角蛋白、α3、β1整联蛋白和纤连蛋白表达阳性。VIII因子相关抗原、6.19抗原和CALLA内肽酶表达为阴性。HK-2细胞保留着近端肾小管上皮细胞的功能特征，例如Na+依赖性/根皮苷敏感性糖转运和腺苷酸环化酶对甲状旁腺有响应，但对抗利尿激素不敏感。该细胞具有生成和储存糖原的能力来证明。HK-2细胞贴壁生长，在甲基纤维素，软琼脂上不生长且不能悬浮生长。每个批次均通过本库支原体检测，结果为阴性。经本库STR检测无误。STR鉴定结果为：Amelogenin: X,Y; CSF1PO: 13; D13S317: 9; D16S539: 11,12; D5S818: 12; D7S820: 10,11; THO1: 9; TPOX: 8,9; vWA: 17,18
Ø 订购须知：
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时拨打电话或邮箱联系；
注：观察细胞最好在低倍镜下观察，便于整体估计细胞密度；
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等；
3. 本库细胞在培养过程不加抗生素，请客户收到细胞后根据需要自行添加双抗（青霉素和链霉素）；
4. 请用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件；
5. 本实验室默认T25瓶复苏的存活细胞常温发货，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落，可离心吹打后重新种入瓶中培养；
6. 建议客户收到细胞后，留存一张培养瓶外观照片以及收到的细胞前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通交流；
7. 细胞培养过程外因太多，我们的售后保障期为一周，具体处理原则参见售后流程图（ www.daucell.cn）或咨询当地销售人员和经销商，但不提供免费更换服务。
Ø 注意事项：
1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
2. 产品使用：本产品仅能用于科研。本产品未通过直接用于活体动物和人的审核。本产品未通过用于活体诊断的审核。
