入门级细胞实验注意事项，总有一个是你要的！
1、什么培养基中可以省去加酚红？
研究表明，酚红可以模拟固醇类激素的作用（特别是雌激素）。为避免固醇类反应，培养细胞，尤其是哺乳类细胞时，不用加。
2、何时须更换培养基？
视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。
3、可否使用与原先培养条件不同的培养基？
不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应的细胞培养基，若骤然使用和原先提供的培养条件不同的培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活。
4、可否使用与原先培养条件不同的血清种类？
不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
5、悬浮性细胞应如何传代处理？
一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞的培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。
6、冷冻管应如何解冻？
取出冷冻管后，须立即放入37℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其尽快全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另外，冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂。
7、细胞冷冻管解冻培养时，是否应马上去除DMSO？
除少数特别注明对DMSO 敏感的细胞外，绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞)，在解冻之后，应直接放入含有10-15 mL新鲜培养基的培养角瓶中，待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可，如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附的问题。
8、欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？
回收动物细胞，其离心速率一般为300×g（约1000 rpm），5-10 分钟，过高的转速，将造成细胞死亡。
9、细胞冷冻培养基的成份为何？
动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含5-10% DMSO（dimethyl sulfoxide）和90-95% 原来细胞生长用的新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO 稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成。
10、冷冻保存细胞的方法？
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃，30-60分钟→置于-20℃，30分钟→置于-80℃，16-18小时（或隔夜）→液氮槽vaporphase长期储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序的可程序降温机中每分钟降1-3 ℃至-80℃以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-20℃不可超过1 小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤，接放入-80℃冰箱中，惟存活率稍微 降低一些。
11、细胞欲冷冻保存时， 细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？
冷冻管内细胞数目一般为1×106 cells/mL vial，融合瘤细胞则以5×106 cells/mL vial 为宜。
12、培养基中是否须添加抗生素？
除于特殊筛选系统中外，一般正常培养状态下，培养基中不应添加任何抗生素。
13、CO2培养箱的水盘如何保持清洁？
定期（至少每两周1次）以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之。
14、 为何培养基保存于4℃冰箱中，颜色会偏暗红色，且pH值会越来越偏碱性？
培养基保存于4℃冰箱中，培养基内的CO2会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中的酸碱指示剂（通常为phenol red）的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。
培养基偏碱的结果，将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤的CO2，以调整pH 值。
15、各种细胞培养用的dish，flask是否均相同？
不同厂牌的dish 或flask，其所coating的polymer不同，制造程序亦不同，虽对大部分细胞没有太大之影响，惟少数细胞则可能因使用厂牌不同的dish 或flask 而有显著的生长差异。
16 、购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少的情形？
研究人员在冷冻细胞的培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可。
17、购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？
研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于-80℃太久。
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