【技术视频】细胞划痕实验

2022-03-14 13:47:56 管理员 345

实验步骤:

1.取出六孔板

2.将六孔板做好标记

3.marker笔在6孔板背后

4.大约0.5~1cm,每孔做5个标记

5.用直尺比着,均匀划横线

6.横穿过孔每孔至少穿过5条线

7.每孔加入2mL培养基

8.每孔加入约5×105细胞

9.具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满

10.将培养板放入培养箱过夜培养

11.取出培养板

12.显微镜下观察细胞密度为100%即可进行划痕检测

13.将培养板放入操作台

14.用移液器取1mL枪头套一个200μL枪头

15.取下枪头,比着培养板盖子,尽量垂至于背后的横线划痕

16.枪头要垂直,不能倾斜,注意不要碰到盖子

17.动作要快速,果断,不宜过重或过轻

18.去除培养基

19.PBS洗去除划下的细胞

20.加入含不同药物的无血清培养基继续培养

21.0h、48h分别拍照,拍照时选取记号笔画的线和细胞划痕的交点作为观察点,以定点观察。


细胞划痕实验(1)


细胞划痕实验(2)

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