【技术视频】细胞转染

细胞转染实验步骤：

1、转染实验试剂展示：Opti-MEM培养基，miRNA，Lipofectamine™ 2000 Transfection Reagent；

2、取出6孔培养板；

3、提前做好标记；

4、每孔加入2mL培养基；

5、调整细胞浓度，每孔加入5×10^5 个细胞；

6、混匀细胞；

7、将6孔板放入培养箱，过夜培养，使细胞贴壁；

8、取出3个1.5mL EP管，做好标记，2个miRNA管，1个Lip2000管；

9、其中2个miRNA管每管加入250μL Opti-MEM培养基；

10、Lip2000管加入500μL Opti-MEM培养基；

11、Lip2000管加入10μL Lipofectamine™ 2000 Transfection Reagent，轻轻吹吸混匀；

12、miRNA管每管加入5μL（100pmol）miRNA，轻轻吹吸混匀；

13、室温下静置 5 min；

14、将Lip2000管液体按照每管255μL缓缓加入miRNA管，轻轻吹吸混匀；

15、室温静置20min；

16、取出培养板，吸除培养基；

17、每孔加入1.5mL新鲜培养基；

18、将510µL复合物加入对应孔中；

19、轻轻晃动6孔板；

20、将6孔板放入培养箱；

21、培养4h后取出培养板；

22、吸除培养基；

23、每孔加入2mL新鲜培养基；

24、将6孔板放入培养箱，培养24h-72h后进行后续检测。

细胞转染（1）

细胞转染（2）

细胞转染（3）