细胞划痕实验是检测细胞运动中一种成本极低又简单易行的体外试验方法。
原理：当细胞长到融合成单层状态时，在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。在细胞迁移过程中在开始和定期捕获图像，通过比较图像以确定细胞迁移速率。
实验步骤：
1.划线：先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀的划横线，大约每隔0.5~1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5条线
2.铺板：处于对数生长期的细胞，胰蛋白酶消化成单细胞悬液，接种于6孔培养板；细胞铺板6×105个细胞/孔，确保第二天细胞能够长满，每孔最终的培养基总量2mL；
3.细胞培养37℃、5％CO2培养箱中培养24h
4.划痕：第二天用*头比着直尺，尽量垂直于背后的横线划痕，*头要垂直，不能倾斜(不同孔之间最好使用同一只*头)
5.清洗：PBS洗细胞3次，去除划下的细胞，加入无血清培养基
6.拍照：4倍镜下进行拍照，保证划痕居中且垂直，注意背景一致，可按0，6，12，24h时间点取样，拍照(具体时间依实验需要而定
但是！
在此之前有个非常重要的步骤，选择细胞一定要注意：
1.避免选择生长特别缓慢的细胞（例：内皮细胞）
（内皮细胞）
2.避免选择贴壁不牢的细胞（例：神经母细胞瘤）
(神经母细胞瘤)
3.避免选择堆积生长或长不满的细胞（例：巨噬细胞）
(巨噬细胞）
实验过程中出现的一些常见问题及解决方案：
问题 1 ：细胞划痕时发现细胞没有长满，或是长的太满？
解决 1 ：铺板时的数量须根据细胞的形态、增殖速度、大小进行调节，细胞较小或增殖速度慢，铺板数量需多于6 ×105个细胞/孔；细胞较大或增殖速度较快则需少于6 ×105 个细胞/ 孔；
问题2 ：细胞铺板时， 前面铺的孔细胞密度稀， 后面铺的孔细胞密度密？
解决2 ：细胞铺板， 细胞单细胞悬液混合后， 铺板过程中需要边
铺板边晃动管子， 保证细胞在悬液中均匀分布；
问题3 ：拍出来的照片背景颜色不一或亮度不一？
解决3 ：在拍照前进行白平衡；固定曝光时间。
作为肿瘤细胞转移研究中的重要角色，这个任重道远的过程需要很多必不可少的步骤，准确易行也是对实验的要求之一。
