• 如何选择合适的细胞培养基

    MEM细胞培养基细胞培养是实验室里最常见和最基本的实验了,但却不是最简单的。别小看细胞培养,这里可蕴含着大学问。有时候细胞状态不好,转染 、药筛这些实验根本就没办法做。影响细胞培养的因素很多,让我们先从培养基和血清说起。经典的培养基有很多种,Invitrogen (GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DM

    2021-08-04 道赛尔生物 583

  • 【主题学习】细胞冻存与复苏及细胞计数存活测试的操作方法与步骤

    细胞冷冻与复苏是细胞培养的常规工作,可以解决细胞因为连续继代造成的退变或转化。细胞的原代培养和传代培养以及细胞冻存和复苏后都需要细胞计数。一、细胞冷冻保存1、材料:生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO (Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0.4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、等速降

    2021-08-03 道赛尔生物 378

  • 【专题讨论】细胞培养的成功因素——细胞消化篇

    许多同学对细胞消化做了许多研究,得出了很多有价值的经验,也见到很多人的困惑。其实细胞培养,尤其是细胞系的培养,就消化而言,不是太难,做得多了,善于总结经验,就能把细胞越养越好。今天,只讲一些基本操作背后的知识,如果不对之处,欢迎指正,一起讨论:1、其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足

    2021-08-02 道赛尔生物 493

  • 细胞自噬的研究方法介绍

    一、自噬诱导剂 (1) Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin :模拟内质网应激(2) Carbamazepine/ L-690,330/ Lithium Chloride(氯化锂):IMPase抑制剂(即Inositol monophosphatase,肌醇单磷酸酶)(3) Earle's平衡盐溶液:制造饥饿(4) N-Acetyl-D-sph

    2021-08-02 道赛尔生物 309

  • 内皮细胞和上皮细胞的区别

    内皮细胞(endothelial cells)覆盖血管的内表面,上皮细胞则是覆盖内部器官的内表面。上皮细胞同时还覆盖人体的外表面。尿检时如果在尿液中发现大量的上皮细胞,则表明尿路感染。 构成组织的内皮细胞与上皮细胞都来源于上皮,但这两者在位置,结构,功能上均有所不同。此外,这两种细胞都构成了内层与外环境的接触面(interface)。内皮细胞位于身体的"内部&q

    2021-07-26 道赛尔生物 1604

  • 【技术视频】细胞的消化传代

    细胞的消化传代操作步骤:1.点燃酒精灯,用酒精棉球擦拭台面;用酒精喷壶给手及所需使用的试剂瓶表面消毒2.使用镊子小心的打开培养瓶瓶盖3.倒出废液4.加入2mlPBS清洗两遍细胞5.加入1ml胰酶消化6.放入培养箱计时3分钟,具体时间因细胞而异,黏附越强,消化时间越长7.对光观察细胞状态,是否变成雾状清晰可见8.最好在镜下观察细胞变圆时终止消化9.加入1ml培养基终止消化10.枪头轻轻吹打,使培养瓶

    2021-07-20 道赛尔生物 581

  • 小鼠骨髓间充质干细胞原代培养的流程

    现在国内已经有很多做原代培养技术成熟的公司和课题组,但由于自身平台有限很难联系到那些课题组,且对方可能也不愿分享,而商业公司多以技术壁垒、商业机密、专利等借口不愿意提供具体培养的细节,在网上也难以获取靠谱的实验流程,国内外的论文也是各执一词,没有形成统一、高效的培养体系;大多数科研者也没有时间和金钱去验证其真伪,有的文章培养出来的干细胞连三系分化验证图都没有,而流式细胞术的验证图想要

    2021-07-19 道赛尔生物 706

  • 细胞培养技术篇——细胞冻存与复苏

    细胞冻存和复苏技术是细胞培养过程中较为基础的实验操作,此举对于细胞的保种以及细胞活力的维持有着重要意义,下面就细胞冻存及复苏过程中的一些理论及实践拿来与大家分享。细胞冻存和复苏的原则是:慢冻速融,这样更加有利于保持细胞的活力。冻存细胞不加任何保护剂,会导致细胞内冰晶的产生,从而使细胞产生内源性的机械损伤,引起细胞内环境渗透压,PH,电解质等的改变,进而促使细胞死亡。常用的冻存保护剂为二甲基亚砜(D

    2021-07-12 道赛尔生物 906

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