• 细胞划痕实验

    细胞划痕实验是检测细胞运动中一种成本极低又简单易行的体外试验方法。原理:当细胞长到融合成单层状态时,在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域,称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。在细胞迁移过程中在开始和定期捕获图像,通过比较图像以确定细胞迁移速率。实验步骤:1.划线:先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀的划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过

    2021-08-11 道赛尔生物 516

  • 如何做好细胞克隆形成

    (一)实验目的通过细胞在细胞培养板上的克隆形成能力来提示细胞的增殖能力。(二)实验原理克隆形成是测定细胞增殖能力的有效方法之一。单个细胞在体外持续6代以上,其后代所组成的细胞群称为克隆。这时每个克隆含有50个以上的细胞,大小在0.3-1.0 mm之间,通过计数克隆形成率,可对单个细胞的增殖潜力做定量分析,了解细胞的增殖能力和独立生存能力。(三)实验流程(四) 实验材料生物安全柜、荧光显微镜、离心机

    2021-08-10 道赛尔生物 593

  • 细胞技术COIP操作及注意事项

    一、原理: 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质 X 的抗体免疫沉淀 X,那么与 X 在体内结合的蛋白质 Y 也能沉淀下来。目前

    2021-08-09 道赛尔生物 575

  • 流式细胞术常见问题问答

    1、流式细胞仪上的FL2-W FL2-A FL2-H 分别是做什么的? FL2-W是只检测荧光的脉冲宽度, FL2-H是指脉冲高度。通常在做细胞周期分析时应用,用于去除粘连细胞。2、流式同型对照怎样选择? 同型对照(IsotypeControl):使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免疫球蛋白及亚型的免疫球蛋白,用于消除由于抗体非特异性结合到细胞表面而产生的背

    2021-08-09 道赛尔生物 1249

  • 细胞培养基的基本要求(细胞培养基,培养基,渗透压,激素)

    体外培养的细胞直接生活在培养基中,因此培养基应能满足细胞对营养成分、促生长因子、激素、渗透压、pH等诸多方面的要求。一、营养成分 维持细胞生长的营养条件一般包括以下几个方面: 1.氨基酸: 是细胞合成蛋白质的原料。所有细胞都需要12种必须氨基酸:缬氨酸、亮、异亮、苏、赖、色、苯丙、蛋、组、酪、精氨酸、胱氨酸。此外还需要谷氨酰胺,它在细胞代谢过程中有重要作用,所

    2021-08-08 道赛尔生物 157

  • 细胞培养基础篇-复苏

    细胞培养看似简单,但实则有很多细节需要注意,今天就从最基础的细胞复苏说起,当然内容主要还是针对新入门的“学徒”,如有不足之处,也请广大站友不吝赐教。操作步骤:1.从液氮罐中取出冻存管,放入37度水浴锅中融化,800-1000rpm离心3-5min;2.慢慢吸去上清,加入适量完全培养基重悬细胞团,转移至培养皿或细胞瓶;3.补足完全培养基,放37度培养箱中培养。注意细节:1.从液氮罐中拿出冻存管时要做

    2021-08-07 道赛尔生物 372

  • 细胞培养基础篇-传代

    传代是贴壁细胞培养过程中不可或缺的一步,也是最容易出问题的一步,今天就来说下细胞传代的操作步骤和注意细节。操作步骤:1.用移液器吸走原培养基,加入适量PBS洗1-2遍;2.加入适量胰酶,置于培养箱中消化;3.待消化到位后加入适量血清或完全培养基终止消化,800-1000rpm离心3-5min;4.去上清,加入适量完全培养基重悬后转移到培养皿,放37度培养箱。注意细节:1.吸走原培养基时尽量吸尽,用

    2021-08-06 道赛尔生物 264

  • 【主题学习】细胞实验总结

    MTT原理:MTT是一种检测细胞功能的方法。细胞在活化增殖的过程中,线粒体的能量代谢能够把MTT代谢为蓝紫色的甲臜,甲臜沉积于细胞内或细胞周围,形成甲臜的量与细胞活化的程度成正比,通过盐酸异丙醇或其他溶剂溶解甲臜,用酶标仪测溶液的光密度就可以反映甲臜的量并从而判断细胞活化增殖的程度。步骤:1、培养好细胞种板。 养细胞没啥好说的,如果不知道细胞如何养,那就看看相关的文献方法。如果知道了细

    2021-08-05 道赛尔生物 408

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