• 细胞培养基的基本要求(细胞培养基,培养基,渗透压,激素)

  体外培养的细胞直接生活在培养基中，因此培养基应能满足细胞对营养成分、促生长因子、激素、渗透压、pH等诸多方面的要求。一、营养成分 维持细胞生长的营养条件一般包括以下几个方面： 1.氨基酸： 是细胞合成蛋白质的原料。所有细胞都需要12种必须氨基酸：缬氨酸、亮、异亮、苏、赖、色、苯丙、蛋、组、酪、精氨酸、胱氨酸。此外还需要谷氨酰胺，它在细胞代谢过程中有重要作用，所

  2021-08-08 道赛尔生物 157

• 细胞培养基础篇-复苏

  细胞培养看似简单，但实则有很多细节需要注意，今天就从最基础的细胞复苏说起，当然内容主要还是针对新入门的“学徒”，如有不足之处，也请广大站友不吝赐教。操作步骤：1.从液氮罐中取出冻存管，放入37度水浴锅中融化，800-1000rpm离心3-5min；2.慢慢吸去上清，加入适量完全培养基重悬细胞团，转移至培养皿或细胞瓶；3.补足完全培养基，放37度培养箱中培养。注意细节：1.从液氮罐中拿出冻存管时要做

  2021-08-07 道赛尔生物 372

• 细胞培养基础篇-传代

  传代是贴壁细胞培养过程中不可或缺的一步，也是最容易出问题的一步，今天就来说下细胞传代的操作步骤和注意细节。操作步骤：1.用移液器吸走原培养基，加入适量PBS洗1-2遍；2.加入适量胰酶，置于培养箱中消化；3.待消化到位后加入适量血清或完全培养基终止消化，800-1000rpm离心3-5min；4.去上清，加入适量完全培养基重悬后转移到培养皿，放37度培养箱。注意细节：1.吸走原培养基时尽量吸尽，用

  2021-08-06 道赛尔生物 264

• 【主题学习】细胞实验总结

  MTT原理：MTT是一种检测细胞功能的方法。细胞在活化增殖的过程中，线粒体的能量代谢能够把MTT代谢为蓝紫色的甲臜，甲臜沉积于细胞内或细胞周围，形成甲臜的量与细胞活化的程度成正比，通过盐酸异丙醇或其他溶剂溶解甲臜，用酶标仪测溶液的光密度就可以反映甲臜的量并从而判断细胞活化增殖的程度。步骤：1、培养好细胞种板。 养细胞没啥好说的，如果不知道细胞如何养，那就看看相关的文献方法。如果知道了细

  2021-08-05 道赛尔生物 408

• 如何选择合适的细胞培养基

  MEM细胞培养基细胞培养是实验室里最常见和最基本的实验了，但却不是最简单的。别小看细胞培养，这里可蕴含着大学问。有时候细胞状态不好，转染 、药筛这些实验根本就没办法做。影响细胞培养的因素很多，让我们先从培养基和血清说起。经典的培养基有很多种，Invitrogen (GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DM

  2021-08-04 道赛尔生物 584

• 【主题学习】细胞冻存与复苏及细胞计数存活测试的操作方法与步骤

  细胞冷冻与复苏是细胞培养的常规工作，可以解决细胞因为连续继代造成的退变或转化。细胞的原代培养和传代培养以及细胞冻存和复苏后都需要细胞计数。一、细胞冷冻保存1、材料：生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO (Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene　5000-0020)、0.4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、等速降

  2021-08-03 道赛尔生物 378

• 【专题讨论】细胞培养的成功因素——细胞消化篇

  许多同学对细胞消化做了许多研究，得出了很多有价值的经验，也见到很多人的困惑。其实细胞培养，尤其是细胞系的培养，就消化而言，不是太难，做得多了，善于总结经验，就能把细胞越养越好。今天，只讲一些基本操作背后的知识，如果不对之处，欢迎指正，一起讨论：1、其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足

  2021-08-02 道赛尔生物 493